Valutazione degli isoenzimi della fosfatasi alcalina nel cane tramite precipitazione con lectina di germe di grano ed inibizione con tetramisolo: risultati preliminari

Marchetti, Veronica and Luchetti, Elena and Cardini, Giovanni and Podestà, Adriano and Fantei, Nicole (2005) Valutazione degli isoenzimi della fosfatasi alcalina nel cane tramite precipitazione con lectina di germe di grano ed inibizione con tetramisolo: risultati preliminari. Annali della Facoltà di Medicina veterinaria, LVIII/ . pp. 275-285. ISSN 0365-4729

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Abstract

RIASSUNTO Nel siero di cane è possibile valutare l’attività di 3 isoenzimi della fosfatasi alcalina (ALP): l’isoenzima epatico (LALP), l’isoenzima osseo (BALP) e l’isoenzima glicocorticoide- indotto (CALP) che si trova solo in questa specie. Poiché nel cane la misurazione dell’ALP totale (TALP) nel siero risulta un test poco specifico, lo studio delle forme isoenzimatiche può aiutare nell’interpretazione di un suo incremento, in particolare in corso di iperadrenocorticismo, patologie neoplastiche e croniche in genere. La quantificazione degli isoenzimi è stata eseguita su 19 campioni di plasma di cani con livelli di TALP superiori a 200 U/L (valori di riferimento 50-130 U/L) applicando la metodica che combina la precipitazione selettiva con WGL (Wheat Germ Lectin) all’inibizione chimica con tetramisolo 4,2 mM. Nel 100% dei cani con morbo di Cushing la CALP rappresentava l’isoenzima predominante, mostrando quindi una buona accuratezza (89%) e specificità (85%) diagnostiche, ed un ottima sensibilità (100%). Tra i valori di TALP e CALP non è stata evidenziata però alcuna correlazione significativa (p<0,05), così come non correlati significativamente risultano gli incrementi di LALP e CALP, riscontrati rispettivamente nell’88,9% e 11,1% dei pazienti con patologia cronica. Tale dato può essere messo in relazione ad una possibile induzione degli isoenzimi in diversi tessuti o l’induzione di enzimi a loro volta responsabili del rilascio degli isoenzimi dell’ALP dalle membrane cellulari. Nel gruppo dei pazienti neoplastici è stata evidenziata una correlazione statisticamente significativa (p<0,05) fra il valori di TALP e di LALP, che risulta l’enzima prevalente nell’80% dei soggetti. Tale risultato suggerisce la possibilità di una patologia epatica subclinica nel paziente oncologico, o un aumento del cortisolo endogeno, che induce inizialmente un incremento della LALP e successivamente della CALP. La valutazione degli isoenzimi dell’ALP attraverso questa metodica, che risulta economica e piuttosto rapida, può quindi essere utile nello screening dell’iperadrenocorticismo del cane, nonché per lo studio dei meccanismi eziopatogenetici alla base dell’iperfosfatasemia in corso di patologie croniche e neoplastiche. SUMMARY In canine serum three isoenzymes are identified: liver ALP (LALP), bone ALP (BALP), corticosteroid-induced ALP (CALP) which is present only in this species. As total ALP activity (TALP) in serum has low specificity in dog, the evaluation of isoenzymes can be useful to interpretation of hyperphosphatasemia. Nineteen canine plasma samples with TALP activity over 200 U/L (reference range for healthy dogs: 50-130 U/L) were tested and isoenzymes were determinate with an assay combining wheat germ lectin (WGL) precipitation and chemical inhibition with tetramisole 4.2 mM. The CALP is the prevalent isoenzyme in 100% of dogs with hyperadrenocorticism, showing a good accuracy (89%) and specifity (85%), and a very good sensitivity (100%). Serum total AP activity was not significantly and positively correlated (p<0.05) with CALP in patients with hyperadrenocorticism, and with LALP (88.9% of cases) and CALP (11.1% of cases) in dogs with chronic illness. This finding suggests possible induction of isoenzymes in several tissues or induction of enzymes responsible for release of ALP isoenzymes from cellular membranes. In neoplastic group, a significant correlation (p<0.05) was noted within TALP and LALP values, prevalent isoenzymes in 80% of dogs. This finding can result from subclinical liver injury in neoplastic dog, or an increment of cortisol, that induce an early LALP increase and subsequently an increase of CALP. In dogs, ALP isoenzymes determination, with this method, cheap and somewhat rapid, can result as a useful screening test for Cushing syndrome, and for study of ethiopathogenetic mechanisms of hyperphosphatasemia during chronic and neoplastic illness.

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